بیان پپتید سنتتیک m2e-ha2 ویروس آنفلوانزا بر روی سطح باکتریوفاژ m13 به منظور افزایش قدرت آنتی ژنیسیتی آن

تکنیک نمایش روی سطح فاژ می تواند برای بیان پپتیدهای کوچک مورد استفاده قرار گیرد. از جمله فاژهایی که در این روش مورد استفاده قرار می گیرند فاژ رشته ای m13 می باشد. این فاژ می تواند پپتیدهایی با تعداد اسید آمینه کم را بر سطح پروتئینهای پوششی خود از جمله پروتئینهای pviii و piii بیان کند و فاژهای نوترکیب بوجود آمده قادر به القاء پاسخ های ایمنی سلولی و همورال می باشند که این مسئله فاژ را به یک سیستم تحویل آنتی ژن جذاب تبدیل کرده است. هدف از مطالعه حاضر نمایش یک پپتید مصنوعی شامل دو اپی تپ m2e وha2 ویروس آنفلوانزا بر روی سطح پروتئین pviii فاژ رشته ای m13 می باشد. به این منظور ابتدا ژن پپتید آنفلوانزا و ژن gviiiمربوط به فاژ با استفاده از روش assembly pcr به یکدیگر اتصال داده شدند، سپس ژن بدست آمده داخل فاژمید وکتور pit2 کلون شد و در سلول اشریشیاکلی سویهtg1 بیان گردید و در نهایت فاژ نوترکیب حاصله خالص سازی شد. نتیجه توالی یابی نشان داد که ژن پپتید و ژن gviii به درستی در فاژمید وکتور کلون شده است . بیان پپتید مورد نظر بر روی سطح فاز در آزمایشات وسترن بلاتینگ، دات بلاتینگ و الایزا با استفاده ازآنتی بادی پلی کلونال مورد بررسی قرار گرفته و تایید شد. نتایج به دست آمده نشان داد که فاژ نوترکیب بدست آمده، که پپتید m2e -ha2 بر روی سطح آن بیان گردیده است، می تواند جهت ایمنی زایی مورد استفاده قرار گیرد.